驗證方案的審批
項目（Items）   內(nèi)容（Content）	姓名 （Name）	部門/職位（Dep./Post）	簽名 （Signature）	日期 （Date）
起草人 （Prepared by）		QC
審核人 (Reviewed by)	梁召權(quán)	設(shè)備部
審核人 (Reviewed by)	柴景明	質(zhì)量部
批準(zhǔn)人 (Approved by)	于紅梅	質(zhì)量負(fù)責(zé)人

 
 
 
 

目 錄
 
1 目的3
2 范圍3 
3 概述3
4 驗證類別5
5 驗證前準(zhǔn)備5
5.1驗證人員及職責(zé)5
5.2驗證引用文件的確認(rèn)6
5.3儀器儀表校驗的確認(rèn)6
6 驗證內(nèi)容及合格標(biāo)準(zhǔn)7
6.1相關(guān)條件的確認(rèn)7
6.2驗證步驟8
6.3驗證合格標(biāo)準(zhǔn)10
6.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析11
7 偏差分析11
8 變更處理11
9  驗證結(jié)論及評價11
10 再驗證周期11
11 文件修訂12
12 附錄及附表12
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
1目的
本驗證是為了確認(rèn)滅菌器的各種功能可以達(dá)到生產(chǎn)要求，設(shè)備能夠在預(yù)定的操作范圍之內(nèi)穩(wěn)定運行，其性能滿足生產(chǎn)工藝的要求。
2范圍
本驗證范圍是確認(rèn)微生物實驗室滅菌柜能夠滿足生理鹽水、微生物檢測用具等物品的滅菌要求，此次驗證主要包括空載熱分布測試、滿載熱分布測試、滿載熱穿透實驗。
此驗證方案計劃于2014年1月17日-10月25日給予實施。
3 概述
3.1 設(shè)備描述

設(shè)備名稱	壓力蒸汽滅菌器	設(shè)備編號
制造商		滅菌容積		150L
安裝地點		材質(zhì)
設(shè)備結(jié)構(gòu)描述	設(shè)備主要由主體、密封圈、滅菌筐、加熱盤管幾部分組成。
主要技術(shù)參數(shù)	最高工作壓力		0.165MPa
	額定工作溫度		125℃
	熱均勻度		≤±1℃
	電源電壓		220V50Hz
	電熱管功率		4．5KW
工作原理描述	預(yù)熱階段：將水溫升至100℃。 升溫階段：放入物品后繼續(xù)加熱，使柜內(nèi)溫度逐漸升高。 滅菌階段：升溫至設(shè)定值后，保持一定時間滅菌。 冷卻階段：排放內(nèi)部蒸汽。 結(jié)束：當(dāng)柜內(nèi)壓力達(dá)到安全壓力時，工作結(jié)束。
主要用途	用于*******等物品的滅菌。

3.2滅菌程序描述

滅菌程序采用不低于121℃，30min。濕熱滅菌程序包括以下階段或步驟：
ü 通飽和蒸汽；
ü 加熱；
ü 滅菌；
ü 冷卻。
實現(xiàn)滅菌的三個重要條件分別是：溫度，時間和飽和蒸汽。
典型的滅菌T~t曲線如下：
 

3.3驗證方法學(xué)描述

3.4 D、Z、F0值
D值是微生物的耐熱參數(shù)，是指在一定溫度下將微生物殺滅90%，即使之下降一個對數(shù)單位所需的時間。D值越大，微生物耐熱性越強。
Z值是滅菌溫度系數(shù)，是指某一種微生物的D值變化一個對數(shù)單位，滅菌溫度應(yīng)升高或下降的度數(shù)。其描述的是微生物對溫度變化的敏感程度，Z值越大，微生物對溫度變化的敏感程度越弱；通常Z取10。
F0值為121℃下的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間。滅菌采用過度殺滅（Over Kill）的概念，即F0≥30。非121℃時的F0值按下公式進(jìn)行計算：

：滅菌時間；
Z：滅菌溫度系數(shù)，Z通常取10；
3.5工藝參數(shù)設(shè)定

項目	溫度/運行時間
空載熱分布測試	121℃/30min
滿載熱分布測試	121℃/30min
滿載熱穿透測試及微生物挑戰(zhàn)測試	121℃/30min

4驗證類別
再驗證
5驗證前準(zhǔn)備
5.1驗證人員及職責(zé)
5.1.1 QC
5.1.1.1負(fù)責(zé)起草、審核驗證方案和報告；負(fù)責(zé)對參與驗證的所有人員進(jìn)行方案的培訓(xùn)，確定所有人員有能力實施本方案。
5.1.1.2按照驗證方案執(zhí)行驗證，收集驗證數(shù)據(jù)并分析、總結(jié)報告；
5.1.1.3負(fù)責(zé)記錄驗證執(zhí)行過程中出現(xiàn)的所有偏差，對關(guān)鍵的偏差應(yīng)調(diào)查，在偏差關(guān)閉之前不得執(zhí)行隨后的驗證工作。
5.1.2質(zhì)量部
5.1.2.1負(fù)責(zé)審核驗證方案和報告；
5.1.2.2負(fù)責(zé)驗證過程樣品的檢測。
5.1.2.3負(fù)責(zé)審核方案和驗證報告；
5.1.2.4參與驗證過程偏差的調(diào)查；
5.1.2.5負(fù)責(zé)驗證技術(shù)支持；
5.1.2.6負(fù)責(zé)對環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測；
5.1.3質(zhì)量負(fù)責(zé)人
5.1.3.1負(fù)責(zé)批準(zhǔn)驗證方案和報告。
5.1.2驗證小組成員及分工
 

姓名	部門	在本驗證小組中擔(dān)任的職務(wù)	崗位	職責(zé)
柴景明	質(zhì)管部	組長		負(fù)責(zé)方案的起草，對驗證方案進(jìn)行培訓(xùn)并組織實施。
	質(zhì)管部	組員	質(zhì)微生物檢驗員	負(fù)責(zé)設(shè)備運行前各項目檢查及設(shè)備運行的操作。
	質(zhì)量部	組員		負(fù)責(zé)生物指示劑的培養(yǎng)檢測。
王瑩	質(zhì)量部	組員		監(jiān)督過程的實施，并負(fù)責(zé)取樣

5.1.3人員資格審查及方案培訓(xùn)的確認(rèn)
本驗證小組所有成員在驗證之前應(yīng)接受相關(guān)的培訓(xùn)，如驗證方案、設(shè)備操作SOP、安全注意事項等，并有記錄。培訓(xùn)記錄見附表1《人員培訓(xùn)記錄》。

審查項目	審查方法	存放地點
人員培訓(xùn)檔案	檢查職工培訓(xùn)記錄卡	職工檔案
驗證方案的培訓(xùn)記錄	檢查培訓(xùn)記錄卡	驗證報告

結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                     復(fù)核人/日期：
5.2驗證引用文件的確認(rèn)
5.2.1審查項目、審查方法、接受標(biāo)準(zhǔn)

審查項目	審查方法	接受標(biāo)準(zhǔn)
文件的審批	檢查文件	文件經(jīng)有資格的人員起草、審核和批準(zhǔn)
文件的執(zhí)行	檢查文件	文件在執(zhí)行期內(nèi)

5.2.2驗證引用文件的確認(rèn)

序號	文件/資料名稱	文件編碼	執(zhí)行日期	版本號
1	濕熱滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
3	***滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
4	潔凈服、潔凈鞋滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
5	藥品生產(chǎn)驗證指南2003
6	驗證管理標(biāo)準(zhǔn)

結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
5.3儀器儀表校驗的確認(rèn)
5.3.1審查項目、審查方法、接受標(biāo)準(zhǔn)

審查項目	審查方法	接受標(biāo)準(zhǔn)
校驗記錄	儀器儀表校驗記錄及其校驗合格證	儀器儀表都經(jīng)過了校驗，且都在校驗期內(nèi)、校驗結(jié)果為合格。

儀器儀表校驗的確認(rèn)見附表2《儀器儀表校驗記錄》
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6驗證內(nèi)容及合格標(biāo)準(zhǔn)
6.1相關(guān)條件的確認(rèn)
6.1.1設(shè)備確認(rèn)
6.1.1.1檢查方法：確認(rèn)設(shè)備安裝位置及安裝牢固性，各附件完整性，檢查設(shè)備密封圈密封性能及滅菌器各接口處密封是否良好。
6.1.1.2接受標(biāo)準(zhǔn)：設(shè)備安裝位置正確，安裝牢固，各附件完整，密封圈密封性能及滅菌器各接口處密封良好，均符合技術(shù)參數(shù)要求和工藝要求。
6.1.1.3測試記錄：見附表3《設(shè)備確認(rèn)記錄》。
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6.1.2公用設(shè)施連接確認(rèn)
6.1.2.1檢查方法：檢查滅菌柜是否連接電源、水源、管路開關(guān)等設(shè)施。
6.1.2.2接受標(biāo)準(zhǔn)：均已連接。
6.1.2.3測試記錄：見附表4《公用設(shè)施連接檢查記錄》。
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6.1.3清洗確認(rèn)
6.1.3.1檢查方法：要求用不脫落纖維的已清潔的抹布擦拭滅菌器內(nèi)部。
6.1.3.2接受標(biāo)準(zhǔn)：清潔部位光亮，用潔凈抹布擦拭無黑點等異物。
6.1.3.3測試記錄：見原始記錄《濕熱滅菌器清潔記錄》。
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6.1.4水位檢查。
6.1.4.1檢查方法：查看滅菌器內(nèi)水位是否在現(xiàn)位器以上，以確認(rèn)滅菌柜使用的水源是否合格。
6.1.4.2可接受標(biāo)準(zhǔn)：水位在現(xiàn)位器以上。
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6.1.5  生物指示劑確認(rèn)
6.1.5.1可接受標(biāo)準(zhǔn)：指示劑在有效期內(nèi)；每支指示劑含芽孢不少于1×106。
6.1.5.2確認(rèn)記錄

名稱	生產(chǎn)批號	有效期至	含芽孢量	D值	生產(chǎn)廠家
嗜熱脂肪芽孢 桿菌孢子生物指示劑（ATCC7953）

結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6.2驗證步驟
6.2.1空載程序驗證
6.2.1.1空載熱分布測試
（1）將12支留點溫度計入滅菌室內(nèi)。
（2）一支留點溫度計放在溫度控制傳感器旁，其于留點溫度計均置于腔室各處（留點溫度計分布見下圖），留點溫度計的測溫點不得與金屬其他表面接觸。

探頭分布整體透視圖
其他分布點的具體位置如上圖所示：
（3） 啟動滅菌器 ，達(dá)到滅菌溫度后，溫度應(yīng)不低于121℃，運行30min。
（4）滅菌結(jié)束降溫后，取出溫度計記錄數(shù)據(jù)分析，如果符合空載熱分布測試的標(biāo)準(zhǔn)，依照此操作程序進(jìn)行其余兩次測試。
（5）測試見附表7《空載熱分布測試記錄》。
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6.2.1.2滿載熱分布測試
（1）最大裝載量的確認(rèn):
裝載方式：無菌服；（8件/包）；細(xì)布20塊、****。

（2）滿載熱分布測試
A、在滅菌器中按最差裝載方式放入****物品，把12支留點溫度計按照熱分布探頭布局圖（照片見附表16）所示放入室內(nèi)。
B、啟動滅菌器，達(dá)到滅菌溫度后，溫度應(yīng)不低于121℃，運行30min。
C、滅菌結(jié)束降溫后，取出溫度計記錄數(shù)據(jù)并分析，如果符合滿載熱分布測試的標(biāo)準(zhǔn)，依照此操作程序進(jìn)行其余一次測試。
D見附表8《滿載熱分布測試記錄》。
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
6.2.1.3熱穿透實驗
(1）打開滅菌器，按照指定的最差裝載方式將被滅菌物品放置在腔室中，隨后將12個溫度計按預(yù)先確定的布點圖，放置在被滅菌物品內(nèi)部，同時每只溫度計上放置一個生物指示劑，其中在最差裝載條件下得出的冷點位置放置兩個生物指示劑，上蓋密封。
(2） 使用嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑Bacillus stearothermophilus。
(3）啟動滅菌器，達(dá)到滅菌溫度后，溫度應(yīng)不低于121℃，運行30min。
(4）滅菌結(jié)束，待冷卻后，立即取出所有生物指示劑，進(jìn)行微生物培養(yǎng)。
(5）分別在嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度55-60℃，24h后、48h后及7天后記錄指示劑變化情況，并記錄，同時取一支未經(jīng)處理的生物指示劑作為陽性對照。
(6）培養(yǎng)后的生物指示劑如有任何一支指示劑變黃，則表明有細(xì)菌生長，如果顏色沒有變化，則表明滅菌有效。
(7）滅菌結(jié)束降溫后，取出溫度計記錄數(shù)據(jù)并分析。
(8）見附表9-11《滿載熱穿透測試記錄》、《生物指示劑測試記錄》《生物指示劑孢子數(shù)量確認(rèn)記錄》。
結(jié)論：
 
確認(rèn)人/日期： 
6.2.1.4滅菌后物品質(zhì)無菌檢查 
（1）測試程序：滿載測試時，每次選取接近滅菌柜最冷點的物品兩套。同時將上述三批物品放置至有效期（24小時）后，再進(jìn)行一次無菌檢查。
（2）檢查方法
A、滅菌后檢查：按照《潔凈區(qū)微生物監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》對滅菌后的物品進(jìn)行菌落檢查。接觸面積24～30cm2，迅速蓋好蓋，放入30～35℃倒置恒溫培養(yǎng)72小時，同時取三個空白雙碟做陰性對照，計菌落數(shù)，填寫《物品菌落檢測記錄》。
B、有效期檢查：將物品存放在**** 級下，放置24小時后取出，按照按照《潔凈區(qū)微生物監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》進(jìn)行檢測，樣品編號分別為（A24、、、、、、、、）。
C 標(biāo)準(zhǔn)：滅菌后及放置到有效期后的物品菌落數(shù)為0，檢查合格率100%?？瞻着囵B(yǎng)基對照均無菌生長。
D、見附表12-13《物品菌落檢測記錄Ⅰ》、《物品菌落檢測記錄Ⅱ》
結(jié)論：
確認(rèn)人/日期：                                    復(fù)核人/日期：
 
 
                                   復(fù)核人/日期：
6.3 驗證合格標(biāo)準(zhǔn)

項目	溫度/運行時間
保壓實驗	壓力達(dá)到0.15MPa,保持15min，密封圈無泄漏。
連續(xù)三次空載熱分布	溫度計全部在121℃―123℃，滅菌時間≥30min，滅菌溫度波動≤2℃，滅菌溫度均勻性≤±1℃。
連續(xù)三次滿載熱分布	溫度計全部在121℃―123℃，滅菌時間≥30min，滅菌溫度波動≤2℃，滅菌溫度均勻性≤±1℃。
連續(xù)三次滿載熱穿透實驗及生物指示劑實驗	各點溫度均在121.1℃以上，滅菌時間≥30min，F(xiàn)o值≥30min。 在55-60℃下嗜熱脂肪芽胞桿菌孢子生物指示劑培養(yǎng)7天后，指示劑不變色，對照樣在24h內(nèi)，指示劑變黃色。
滅菌后物品無菌檢查	滅菌后及放置到有效期后的物品菌落數(shù)為0，檢查合格率100%?？瞻着囵B(yǎng)基對照均無菌生長。

 
6.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析
對驗證結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析確認(rèn)脈動真空滅菌柜測試符合要求。
7偏差分析
對驗證過程中所發(fā)生的偏差進(jìn)行處理和分析，并制定糾正預(yù)防措施，必要時要重新進(jìn)行驗證。如有偏差，要完成偏差處理與分析報告表。見附表15。
在驗證過程中如果出現(xiàn)個別項目的不合格情況，應(yīng)該對不符合項進(jìn)行偏差分析，找出原因進(jìn)行整改。對不符合項重新確認(rèn)。
在檢測過程中如果出現(xiàn)檢測項目不合格的情況，認(rèn)真分析原因，如果屬系統(tǒng)問題，進(jìn)行整改，整改后重新驗證。如果是取樣或化驗原因，重新取樣對不合格的指標(biāo)重新化驗。
結(jié)論：
                                   評價人/日期：
8變更處理
本方案在實施過程中如發(fā)生變更，應(yīng)將與變更有關(guān)的所有信息記錄下來，并進(jìn)行分析與評價，填寫驗證變更申請表。見附表16。
結(jié)論：
                                   評價人/日期：
9驗證總結(jié)及評價
通過對滅菌器性能的檢測結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析總結(jié)，確認(rèn)滅菌器及輔助系統(tǒng)的每一部分功能都能達(dá)到生產(chǎn)工藝要求，由驗證小組組長對驗證過程及結(jié)果進(jìn)行綜合評價，評價所要驗證的內(nèi)容是否已達(dá)到驗證合格標(biāo)準(zhǔn)，驗證結(jié)論是否有效。確定本次驗證的結(jié)論。
結(jié)論
 
                                  
                     評價人/日期：
10再驗證周期
滅菌器驗證周期為1年；發(fā)生以下變更時，需要再驗證：
（1）設(shè)備更換、改造或大修后；滅菌工藝發(fā)生改變；
（2）滅菌物品發(fā)生改變；
（3）滅菌物品裝載形式、裝載量發(fā)生變化。
 
11文件的修訂
根據(jù)本方案實施過程中所發(fā)現(xiàn)的問題，對相應(yīng)的SOP進(jìn)行補充和完善，補充及完善的內(nèi)容列入下表中。

文件編號	文件名稱	修訂內(nèi)容

12附表及附錄
附表清單

序號	編號	名稱
1		培訓(xùn)確認(rèn)表
2		儀表校驗檢查記錄
3		設(shè)備確認(rèn)記錄
4		泄漏測試記錄
5		空載熱分布測試記錄
6		滿載熱分布測試記錄
7		滿載熱穿透測試記錄
8		生物指示劑測試記錄
9		生物指示劑孢子數(shù)量確認(rèn)記錄
10		物品菌落檢測記錄Ⅰ
11		物品菌落檢測記錄Ⅱ
12		偏差處理與分析報告
13		驗證變更申請表

 
附表1培訓(xùn)確認(rèn)表
培訓(xùn)確認(rèn)表                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                           
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主講人			日期
培訓(xùn) 內(nèi)容
參加人員：
確認(rèn)內(nèi)容
該驗證所有參與成員均經(jīng)過了培訓(xùn)且能勝任本次驗證工作					□ 是       □ 否
備注：
確認(rèn)人/日期

 
 
 
 
附表2 儀表校驗檢查記錄
儀表校驗檢查記錄
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儀表名稱	型號	編號	有效期至	檢查結(jié)果	檢查人	檢查日期
溫度傳感器
壓力變送器
溫度驗證儀

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
附表3設(shè)備確認(rèn)記錄
 
設(shè)備確認(rèn)記錄
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檢查項目	檢查方法	檢查結(jié)果	檢查人	檢查日期
設(shè)備型號	檢查設(shè)備銘牌	是 □ 否 □
設(shè)備定位	檢查滅菌器安裝地點和位置，在***	是 □ 否 □
材質(zhì)	該蒸汽滅菌柜，采用316L不銹鋼材料制作，密封圈材料為硅橡膠	是 □ 否 □
外觀	確認(rèn)機器外觀是否良好，無缺陷和損壞	是 □ 否 □
操作與維護(hù)	有足夠的空間進(jìn)行操作和維護(hù)	是 □ 否 □
加熱形式	電加熱	是 □ 否 □
加熱功率	按說明書技術(shù)參數(shù)	是 □ 否 □
儀表型號	能滿足工藝要求	是 □ 否 □
動力電源	三相四線、接地良好	是 □ 否 □

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
附表5泄漏測試記錄
 
泄漏測試記錄
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測試日期	開始時間 t1	開始壓力 P1	結(jié)束時間 t2	結(jié)束壓力 P2	泄漏率    P2- P1           t2 - t1
標(biāo)準(zhǔn)	泄漏率標(biāo)準(zhǔn)：保壓15min,每分鐘不得超過0.13Kpa
檢查人/日期				復(fù)核人/日期